液相色谱法只要求样品能制成溶液,不受样品挥发性的限制,流动相可选择的范围宽,固定相的种类繁多,因而可以分离热不稳定和非挥发性的、离解的和非离解的以及各种分子量范围的物质。
高效液相色谱仪色谱柱不平衡。有时液相色谱仪色谱柱的平衡时间很长,特别是当流动相发生变化时,液相色谱仪色谱柱的平衡时间需要很长。在没有平衡之前,高效液相色谱的基线肯定是不稳定的。溶液:用中等极性溶剂冲洗。当改变流动相时,在分析前用10~20倍床体积的新流量冲洗液相色谱仪的色谱柱。
液相色谱经常发生基线不稳。主要原因和解决方法如下:
1.高压泵止回阀堵塞导致基线波动;解决方法:拆除单向阀,用超声波在纯水中浸泡20分钟以上,清除堵塞。
2.流动相溶解气体引起的基线波动。解决方案:超声波脱气15-30分钟或充氮一般可以解决。
3.高压泵垫片损坏,造成液相色谱仪压力波动和基线不稳定。解决方法:更换高压泵的密封垫。
4.高压泵或液相色谱仪的色谱柱设有泄漏点,解决办法是查找和确定泄漏的位置。
5.液相色谱仪的色谱柱因各种原因产生气泡。解决方法:在检测器的水池出口加负压调节器。
6.液相色谱仪检测器波长设置不当,基线不稳定,因为没有设置在最大吸收波长。解决方案:将探测器的测试波长调整到最大吸收波长。